05版药典附录：农药残留量测定法 |
本法系用气相色谱法（附录Ⅵ E）测定药材或制剂中部分有机氯、有机磷和除虫菊酯类农药，除另有规定外，按下列方法测定。
一. 有机氯农药残留量测定
色谱条件与系统适用性试验
弹性石英毛细管柱（30m×0.32mm×0.25μm）SE-54（或DB-1701）；63Ni-ECD电子捕获检测器。进样口温度：230℃；检测器温度：300℃；不分流进样。程序升温：初始100℃，每分钟10℃升至220℃，每分钟8℃升至250℃，保持10分钟。理论板数按α-BHC峰计算应不低于106，两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。
对照品储备液的制备
精密称取六六六（BHC）〔α-BHC，β-BHC，γ-BHC，δ-BHC〕、滴滴涕（DDT）〔PP’-DDE，PP’-DDD，OP’-DDT，PP’-DDT〕及五氯硝基苯（PCNB）农药对照品适量，用石油醚（60～90℃）分别制成每1ml约含4～5μg的溶液，即得。
混合对照品储备液的制备 精密量取上述各对照品储备液0.5ml，置10ml量瓶中，用石油醚（60～90℃）稀释至刻度，摇匀，即得。
混合对照品溶液的制备
精密量取上述混合对照品储备液，用石油醚（60～90℃）制成每1L含0μg、1μg、5μg、10μg、50μg、100μg、250μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备 药材
取供试品于60℃干燥4小时，粉碎成细粉，取约2g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，加水20ml浸泡过夜，加丙酮40ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用丙酮补足减失的重量，再加氯化钠约6g及二氯甲烷30ml，称定重量，超声处理15分钟，再称定重量，用二氯甲烷补足减失的重量，静置（使分层），将有机相迅速移入装有适量无水硫酸钠的100ml具塞锥形瓶中，放置4小时，精密量取35ml，于40℃水浴上减压浓缩至近干，加少量石油醚（60～90℃）如前反复操作至二氯甲烷及丙酮除净，用石油醚（60～90℃）溶解并转移至10ml具塞刻度离心管中，加石油醚（60～90℃）至5ml，小心加入硫酸1ml，振摇1分钟，离心（3000转/分）10分钟，精密量取上清液2ml，置具刻度的浓缩瓶（见图）中，连接旋转蒸发器，40℃下（或用氮气）将溶液浓缩至适量，精密稀释至1ml，即得。
制剂 取供试品，研成细粉（蜜丸切碎，液体直接量取），精密称取适量（相当于药材2g），以下按上述供试品溶液制备法制备，即得供试品溶液。
测定法 分别精密吸取供试品溶液和与之相对应浓度的混合对照品溶液各1μl，注入气相色谱仪，按外标法计算供试品中9种有机氯农药残留量。
二. 有机磷农药残留量测定
色谱条件与系统适用性试验
弹性石英毛细管柱（30m×0.25mm×0.25μm）DB-17MS（或HP-5）；氮磷检测器（NPD）；进样口温度：220℃；检测器温度：300℃；不分流进样；程序升温：初始120℃，每分钟10℃升至200℃，每分钟5℃升至240℃，保持2分钟，每分钟20℃升至270℃，保持0.5分钟。理论板数按敌敌畏峰计算应不低于6000，两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。
对照品储备液的制备
精密称取对硫磷、甲基对硫磷、乐果、氧化乐果、甲胺磷、久效磷、二嗪农、乙硫磷、马拉硫磷、杀扑磷、敌敌畏、乙酰甲胺磷农药对照品适量，用醋酸乙酯分别制成每1ml约含100μg的溶液，即得。
混合对照品储备液的制备 精密量取上述各对照品储备液1ml，置20ml棕色量瓶中，加醋酸乙酯稀释至刻度，摇匀，即得。
混合对照品溶液的制备 精密量取上述混合对照品储备液，用醋酸乙酯制成每1ml含0.1μg、0.5μg、1μg、2μg、5μg的浓度系列，即得。
供试品溶液的制备 药材
取供试品粉末（过二号筛）5.0g，加无水硫酸钠5g，加入醋酸乙酯50～100ml，冰浴超声处理3分钟，放置，取上层液滤过，药渣加醋酸乙酯30～50ml，冰浴超声处理2分钟，放置，滤过，合并两次滤液，用少量醋酸乙酯洗涤滤纸及残渣，与上述滤液合并。取滤液40℃下减压浓缩至近干，用醋酸乙酯转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，精密量取1ml，置活性炭小柱〔120～400目，0.25g，内径0.9cm（如Supelclean
ENVI-Carb SPE Tubes，3ml活性炭小柱），用醋酸乙酯5ml预洗〕上，置多功能真空样品处理器上，用正己烷﹣醋酸乙酯（1:1）的混合液5ml洗脱,收集洗脱液,置氮吹仪上浓缩至近干，精密加入醋酸乙酯1ml使溶解，即得。
测定法 分别精密吸取供试品溶液和与之相对应浓度的混合对照品溶液各1μl，分别注入气相色谱仪，按外标法计算供试品中12种有机磷农药残留量。
三. 除虫菊酯类农药残留量测定
色谱条件与系统适用性试验
弹性石英毛细管柱（30m×0.32mm×0.25μm）SE-54；63Ni-ECD电子捕获检测器；进样口温度：270℃；检测器温度：330℃；分流比20:1；程序升温：初始160℃，保持1分钟,每分钟10℃升至278℃，保持0.5分钟，每分钟1℃升至290℃，保持5分钟。理论板数按溴氰菊酯峰计算应不低于105，两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。
对照品储备液的制备 精密称取顺式氯氰菊酯、氰戊菊酯及溴氰菊酯农药对照品适量，用石油醚（60～90℃）分别制成每1ml约含4～5μg的溶液，即得。
混合对照品储备液的制备 精密量取上述各对照品储备液0.5ml，置10ml量瓶中，用石油醚（60～90℃）稀释至刻度，摇匀，即得。
混合对照品溶液的制备
精密量取上述混合对照品储备液，用石油醚（60～90℃）制成每1L含0μg、1.6μg、8μg、40μg、50μg、200μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备 药材
取供试品于60℃干燥4小时，粉碎成细粉（过五号筛），取约2g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，加石油醚（60～90℃）－丙酮（4:1）30ml，超声处理5分钟，滤过，滤液用适量无水硫酸钠脱水后，于40～45℃减压浓缩至近干。依法再重复两次后，用少量石油醚（60～90℃）反复操作至丙酮除净，残渣加适量石油醚溶解，置混合小柱〔从下至上依次为无水硫酸钠2g、Florisil4g、微晶纤维素1g、氧化铝1g、无水硫酸钠2g，用石油醚（60～90℃）-乙醚（4:1）20ml预洗〕上，用石油醚（60～90℃）－乙醚（4:1）的混合液90ml洗脱，收集洗脱液,
于40～45℃减压浓缩至近干，再用石油醚（60～90℃）3～4
ml替换并浓缩至近干，重复2～3次，用石油醚（60～90℃）溶解转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，即得。
测定法 分别精密吸取供试品溶液和与之相对应浓度的混合对照品溶液各1μl，注入气相色谱仪，按外标法计算供试品中3种菊酯类农药残留量。 |
|
|
|
|
|
| |
|
|
|
|
